在ELISA測試中(zhōng),由于酶和底物(wù)的反應在一(yī)定時間内一(yī)直進行,這樣會影響實驗結果數值,因此需要在特定時間内停止酶和底物(wù)的反應。這需要特定的終止液來完成。
TMB終止液有兩種類型的用于ELISA的TMB顯色終止液:450nm和620nm終止液。
450nm終止液是一(yī)種酸性溶液。TMB在氧化酶的作用下(xià)被氧化成可溶性的藍(lán)色終産物(wù)(吸峰值在620nm左右),該産物(wù)在終止液的作用下(xià)變爲可溶性的黃色産物(wù)(吸峰值在450nm)。此類終止反應可将吸光值提高2-4倍,亦即可将ELISA的敏感性提高2-4倍。620nm終止液被用來終止TMB與氧化酶的反應時,TMB的藍(lán)色終産物(wù)的顔色不改變,并且吸峰值仍在620nm左右。
目前,英創生(shēng)物(wù)生(shēng)産3種酸性終止液和1種620nm終止液。
産品名
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産品編号
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類型
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特點
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TMB 終止液I
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STP-001
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即用型
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爲普通終止液。TMB反應終止後,應盡快讀取結果。否則黃色終産物(wù)有可能形成黑色沉澱,影響結果讀數。
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TMB 終止液II
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STP-002
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即用型
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與1号相比,該終止液可防止黃色終産物(wù)形成黑色沉澱。
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TMB 終止液III
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STP-003
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即用型
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除了可防止黃色終産物(wù)形成黑色沉澱外(wài),還能使吸光值在2小(xiǎo)時内保持不變。
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TMB 終止液IV
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STP-004
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即用型
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TMB的藍(lán)色終産物(wù)的顔色不改變,并且吸峰值仍在620nm左右。
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pNPP終止液是一(yī)種堿性溶液。pNPP在磷酸酶的作用下(xià)形成可溶性的黃色終産物(wù)(吸峰值在405nm)。當加入pNPP終止液後,該黃色終産物(wù)的顔色保持不變,在405nm光譜下(xià)讀數。英創生(shēng)物(wù)隻生(shēng)産1種pNPP終止液,亦爲即用型。
産品名
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産品編号
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類型
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特點
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pNPP終止液I
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STP-pNPP-001
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即用型
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能使吸光值保持不變。
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